COMUNICACIÓN ORAL | 01 noviembre 2023, miércoles | Hora: 11:30
AUTORES
Seto Salvia, Nuria 1; null, Sarah 2; null, Patrick 1; null, Joe 3; null, Charlie 3; null, Umran 4; null, Henry 3; null, Dervis 4; null, Tom 1
CENTROS
1. Servicio de Neurología. Queen Square Institute of Neurology. The Reta Lila Weston Institute of Neurological Studies. UCL; 2. Servicio de Neurología. Queen Square Institute of Neurology. The Reta Lila Weston of Neurological Studies. UCL; 3. Servicio de Neurología. Queen Square Institute of Neurology. UCL; 4. Servicio de Neurología. UK Dementia Research Institute. The Cruciform Building. UCL
OBJETIVOS
El objetivo de este proyecto es investigar tejidos cerebrales post mortem de córtex frontal (CF), ganglios basales (GB), células madre pluripotenciales (iPSC), neuronas corticales (NC) y neuronas espinosas medianas (NEM) derivadas de iPSC en pacientes con distonía DYT1 y controles, con la finalidad de encontrar variabilidades transcriptómicas que subyacen a las vías metabolicas anormales en los pacientes.
MATERIAL Y MÉTODOS
Se utilizaron 10 líneas celulares y 6 donantes de cerebro. Los fibroblastos de 5 controles y 5 pacientes DYT1 sintomáticos se reprogramaron mediante la transducción de plásmido episomal. Las iPSC generadas se diferenciaron en NC y NEM siguiendo protocolos establecidos. Posteriormente se extrajo el ARN de todas las células y tejidos utilizando TRIzol®. Todas las muestras de ARN pasaron los controles de calidad e integridad antes de la secuenciación transcriptómica.
RESULTADOS
La expresión diferencial entre controles y pacientes mostró un alto número de genes desregulados en células y tejidos, especialmente en NC. El análisis de anotación y enriquecimiento apuntaron 96 genes de regulación decreciente y 73 sobre regulados. De todos estos genes, 26 fueron comunes entre células y tejidos, destacando varias vías metabólicas clave.
CONCLUSIONES
Nuestros datos preliminares identificaron diferencias en expresión génica entre pacientes con DYT1 y controles sanos en diferentes tipos de células neuronales y muestras de tejido cerebral. Se están realizando más análisis en los genes con mayores cambios transcriptómicos en distonía, seguido de análisis funcionales y metabólicos que ayudarán a dilucidar las vías específicas en las células implicadas en distonía DYT1 y así obtener tratamientos terapéuticos para futuros ensayos clínicos.
