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Análisis transcriptómico de subpoblaciones leucocitarias en pacientes con neumonía asociada al ictus

Análisis transcriptómico de subpoblaciones leucocitarias en pacientes con neumonía asociada al ictus

COMUNICACIÓN ORAL | 21 noviembre 2018, miércoles | Hora: 17:30

AUTORES

Faura Llorens, Julia 1; García Berrocoso, Teresa 2; Simats Oriol, Alba 2; Gonzalo Sanz, Ricardo 3; Boada Llamas, Cristina 2; Negro Lacort, Alejandro 2; Rubiera del Fueyo, Marta 4; Montaner Villalonga, Joan 2; Bustamante Rangel, Alejandro 2


CENTROS

1. Laboratorio de Investigación Neurovascular. Vall d'Hebron Institut de Recerca; 2. Laboratorio de Investigación Neurovascular. Vall d'Hebron Institut de Recerca (VHIR); 3. Unidad de Estadística y Bioinformática. Vall d'Hebron Institut de Recerca (VHIR); 4. Servicio de Neurología. Hospital Universitari Vall d'Hebron

OBJETIVOS

Se han realizado diversos estudios analizando perfiles de expresión génica de leucocitos en pacientes con ictus, pero nuestro objetivo es estudiar estos perfiles en las tres principales subpoblaciones leucocitarias en pacientes con neumonía asociada al ictus (NAI), y evaluar su asociación con ésta.

MATERIAL Y MÉTODOS

Se incluyeron pacientes con ictus isquémico grave (NIHSS>10), obteniéndose muestra de sangre en las primeras 48 horas. La NAI se definió de acuerdo a los criterios CDC modificados. Se realizó separación celular magnética de las tres principales subpoblaciones leucocitarias (monocitos-CD14+, linfocitos-CD3+ y neutrófilos-CD16+), extrayéndose RNA y realizándose posteriormente arrays de expresión Clariom S (Affymetrix) en las 3 subpoblaciones. Tras controles de calidad y normalización, se obtuvieron listas de genes diferencialmente expresados (p-valor<0.05) en cada grupo, comparando NAI vs. no infección.

RESULTADOS

Se realizó el análisis transcriptómico en 12 pacientes (6 NAI vs. 6 no infección). Con la separación celular se consiguieron unas purezas del 81%(CD14+), 83%(CD3+) y 94%(CD16+). Se encontraron 234 genes diferencialmente expresados en los pacientes con NAI en monocitos, 77 en linfocitos, 1777 en neutrófilos, implicados en distintos procesos biológicos en función de la subpoblación, como vías relacionadas con degranulación y activación del Toll-Like Receptor 4 en neutrófilos.

CONCLUSIONES

Diferentes perfiles de expresión génica entre las subpoblaciones leucocitarias en el ictus agudo se relacionan con el desarrollo de NAI. Los neutrófilos fueron la subpoblación que registró más genes diferencialmente expresados. El estudio de la expresión diferencial podría tener aplicaciones para encontrar nuevos biomarcadores predictores y dianas terapéuticas para combatir las infecciones asociadas al ictus.

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