COMUNICACIÓN POSTER
AUTORES
Vandenbroeck van Caeckenbergh, Koen 1; Mena Lucia, Jorge 1; Ugidos Damboriena, Nerea 1; Ovejero Jauregi, Sergio 1; Elortza , Felix 2; Azkargorta , Mikel 2; Alloza Moral, Iraide 1
CENTROS
1. Servicio: Neurogenomiks. Universidad del País Vasco; 2. Servicio: Plataforma de Proteómica. CICbioGUNE
OBJETIVOS
El gen ANKRD55 contiene SNPs asociados con el riesgo de contraer esclerosis múltiple. Los alelos de riesgo de estos SNP están asociados con niveles más altos de ANKRD55 en las células T CD4+. La función biológica de ANKRD55 es desconocida, pero la presencia de 9 dominios de repetición ankyrin indica que funcione en complejo con otras proteínas. Por lo tanto, la identificación de su interactoma puede proporcionar pistas.
MATERIAL Y MÉTODOS
Identificamos los interactomas de ANKRD55 a través de la sobreexpresión recombinante, purificación de complejos y espectrometría de masas, seguido de análisis de bioinformática y experimentos de validación.
RESULTADOS
Se encontraron 148 proteínas en extractos de proteínas totales y 22 en extractos de núcleos purificados. El análisis bioinformático sugirió caminos relacionados con la unión de nucleótidos y ATP, con transporte nuclear, el ciclo celular y el metabolismo del ARN. La interacción entre ANKRD55 y la RPS3 endógena, las cohesinas SMC1A y SMC3, CLTC, PRKDC, VIM, β-tubulina isoformas y 14-3-3 isoformas fueron validadas por Western Blot, microscopía confocal e inmunoprecipitación inversa. También identificamos tres sitios de fosforilación en ANKRD55, con S436 exhibiendo la puntuación más alta como probable fosfosito de unión 14-3-3.
CONCLUSIONES
Nuestro estudio sugiere que ANKRD55 puede ejercer funciones en la formación o arquitectura de complejos de proteínas múltiples, y está regulado por reacciones de (des) fosforilación, se transporta al núcleo por la vía de importación nuclear clásica y está involucrada en la mitosis, probablemente a través de los efectos asociados con la dinámica del huso mitótico.
